1,将要进行实验的版孔进行设定好,标准品5个点,每个点设定平行,需要用到10个孔,空白只需1个孔。剩下孔可以做为样本孔
2,稀释标准,准备好5个EP管,然后在每个EP管中加入150微升标准稀释液,编上编码,分别为1,2,3,4,5,在1号管中加入150标准品,用枪头反复吹打10次左右(注意控制幅度不要过大容易产生气泡)如果有涡旋仪可以在涡旋仪上涡旋5秒左右,然后换枪头,在1号管中取150微升加入到2号管,后面过程一次类推。等稀释完,前面4个管中每管液体在150微升,5号管为300微升。浓度是从大到小。
3,标准、样本、空白加样:标准是每个浓度点2个孔(做平行),每孔加入50微升,加样过程中注意换枪头,样本孔中每孔加入50微升,加样过程中注意换枪头,空白孔加入50微升蒸馏水。特别要说明的是,标准加样和样本加样尽量控制在15分钟内加完,如果时间拖的太长,会导致前面孔先反应后面孔才开始反应,这样数值偏差过大。加完样后盖上封板膜,至37摄氏度孵育30分钟.
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